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正确使用和维护对c18 色谱柱十分重要

点击次数:147 发布时间:2020-07-10
  在高效液相色谱分析系统中,对c18 色谱柱温度控制的要求越来越高。正确的控制色谱柱的温度对于提高柱效、改善峰分离度、保证重现性、以达预期的分析结果,具有不容忽视的作用
 
  C18色谱柱应用领域:
  强极性和碱性化合物、药物、抗生素、肽和蛋白质。
 

  性能优点:
  1、使用高纯度的硅胶基质;
  2、流动相可以使用100%水溶液的高效液相色谱柱;
  3、对亲水性化合物的保留强;
  4、对于碱性化合物分离良好。
 
  c18 色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。下面,武汉恒信世纪科技有限公司就为大家列举在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护。
  1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。
  2、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
  3、一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
  4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
  5、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
  6、经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。
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